FIXATION DU 2,3-BisPHOSPHOGLYCÉRATE SUR L'HEMOGLOBINE


 

1. Voir le principe de la dialyse à l'équilibre

 

  2. Calcul de la concentration en 32P-BPGlibre ET en 32P-BPGlié
  • A. S. (32P-BPG) = 1,5 Ci.mol-1
  • 1 Ci = 2,2 1012 dpm
===> A. S. (32P-BPG) = 1,5 x 2,2 1012 dpm.mol-1 <==> 1 mole de 32P-BPG = 3,3 1012 dpm

                                                                       valeurs radioactivité (dpm)
Donc :    quantité  32P-BPG (mol)   =   ------------------------------------------
                                                                             3,3 1012 (dpm.mol-1)

Le volume des compartiments est de 500 µL = 500 10-6 L : 

                                                                                           valeurs radioactivité (dpm)
===>   concentration  32P-BPG (mol.L-1)  =   --------------------------------------------------------
                                                                                   3,3 1012 (dpm.mol-1)   x   500 10-6 (L)

 

 

Radioactivité

compartiment A

(dpm)

 

[BPG] LIBRE

(µM)

Radioactivité

compartiment B

(dpm)

[BPG] LIBRE

+ [BPG] LIE

(µM)

4050

2.45

5870

3.56

6830

4.14

9650

5.85

14025

8.5

19025

11.5

29120

17.6

36860

22.3

61000

37

71800

43.5

158400

96

172050

104


 
 

[BPG] LIE

(µM)

nu = [BPG] LIE / [Hb]0

nu / [BPG] libre

(µM-1)

1.1

0.11

0.045

1.7

0.17

0.041

3

0.3

0.036

4.7

0.47

0.027

6.5

0.65

0.018

8.3

0.83

0.0086

 


 

 

Rôle physiologique du 2,3-BPG

 

  • Dans les érythrocytes, le 2,3-BPG est un effecteur allostérique de l'Hb (leur concentration est à peu près la même : 4,7 mM). Le 2,3-BPG se fixe donc en un site distinct de l'oxygène.
  • Une molécule de 2,3-BPG se fixe dans la cavité centrale (au milieu des 4 monomères de l'Hb, voir figure ci-contre). Au pH physiologique, les charges négatives portées par le 2,3-BPG interagissent avec les chrages positives de la cavité centrale de la désoxyHb. La fixation du 2,3-BPG stabilise donc la conformation désoxyHb (forme T selon le modèle MWC).
  • Le 2,3-BPG et l'oxygène ont donc des effets opposés sur l'équilibre :
L
T0 <=====> R0

 

Le rôle physiologique du 2,3-BPG est très important : en faisant basculer la forme oxyHb (forme R, chargée en oxygène) en forme désoxyHb (forme T), il augmente la quantité d'oxygène transférée à la myoglobine dans les muscles et les tissus, malgré la faible pression partielle en oxygène qui y règne.

Source : "Principes de Biochimie"

Horton, Moran, Ochs, Rawn et Scrimgeour (1994)

Ed. DeBoeck Universités