Construction de banques d'ADNc de semences de Pisum sativum et de Medicago truncatula

Jérôme PAINEAU & Chakib BICHRI

Maîtrise de Biologie Cellulaire - Université d'ANGERS   -  Année universitaire 2002-2003

Introduction

• Matériels biologiques
• La souche bactérienne Escherichia coli LE 392
• Le vecteur de clonage : le phage l gt11
• Autres matériels

• Extraction des ARN totaux
• Purification des ARN messagers
• Synthèse premier & second brin ADNc
• Préparation des inserts ADNc
• Encapsidation des phages recombinants
• Transfection de E. coli LE392 et détermination du titre des banques
• Criblage des banques avec une sonde radioactive GDH

Résultats

• ARN totaux
• Purification des ARNm et synthèse des ADNc
• Préparation des inserts ADNc
• Encapsidation des phages recombinants (amorces GDH - amorces l gt11)
• Titre des banques
• Criblage de la banque Pisum sativum imbibition 12 h avec une sonde radioactive GDH

Discussion

Références